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石蜡油在支原体qPCR里面到底起到什么作用？能不能省略？
发布时间： 2026-10-28 点击次数： 4次细心的小伙伴会发现翼和两款试剂盒都配备石蜡油组分，不少用户疑惑：现在qPCR管密封性很好，石蜡油是不是多余，可以省掉不加？
不建议省略石蜡油！
支原体qPCR最大风险是扩增产物气溶胶交叉污染。qPCR扩增后会产生大量支原体DNA扩增子。开盖、离心、封膜操作，会产生气溶胶漂浮在操作台。后续实验样本就会被扩增产物DNA污染，出现假阳性。石蜡油覆盖在反应液上层，物理隔绝水相反应体系与上层空气，闭管条件下抑制水相挥发，减少气溶胶生成，尤其适合需要多次开盖加模板的30 μL体系。
注意加样顺序：先分装Mix，再加石蜡油，最后穿过油层加入模板DNA。
省略石蜡油不是做不出结果，但是会显著提升实验室假阳性风险。市面上部分试剂盒省去石蜡油，对实验室防污染操作提出相对要求。翼和支原体试剂盒配套石蜡油，降低普通实验室操作门槛。
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