嗜肺巴氏杆菌的PCR检测方法

 嗜肺巴氏杆菌的生理特点

嗜肺巴氏杆菌是革兰氏阴性小杆菌，主要寄居于啮齿类和免类的上呼吸道。嗜肺巴氏杆菌是实验小鼠和大鼠易感染的病原菌，较难通过有效的方法进行排除。嗜肺巴斯德杆菌（Pasteurella pneumotropica）是国标GB14922-2022中SPF级实验大小鼠必须排除的项目之一，是啮齿类实验动物中重要的巴氏杆菌科物种。嗜肺巴氏杆菌的宿主广泛，人和啮齿类动物均可感染嗜肺巴氏杆菌，感染可能来自与动物的密切接触或被鼠咬伤。啮齿类动物感染嗜肺巴氏杆菌后可不表现出任何病理症状。嗜肺巴氏杆菌与其他病原共感染后出现症状，如支原体、仙台病毒等共同感染，可加重疾病的过程。

一般来说，嗜肺巴斯德杆菌主要包括两种生物型：Jawetz型（J型）和Heyl型（H型），另外还有一些其他分离株。近年重新分类后，上述两种类型分为：嗜肺啮齿杆菌（Rodentibacter pneumotropicus，即原嗜肺巴斯德杆菌J型）和 啮齿杆菌H型（Rodentibacter heylii，即原嗜肺巴斯德杆菌H型）。目前的检测方法不对这两种类型进行分类。

嗜肺巴氏杆菌的传统检测方法

国标GB/T 14926.12-2001中指出，嗜肺巴氏杆菌是革兰氏阴性小杆菌，嗜肺巴斯德杆菌具有特殊的生化反应，菌体可与相应的免疫血清在玻片上形成肉眼可见的凝集反应，据此可进行该菌的分离培养和检测。

嗜肺巴氏杆菌的qPCR检测方法

PCR是基于核酸DNA的检测方法，灵敏度高，可在病原检测初期检测到。应用于病原体检测时，检测方法简单，不需要长时间培养，操作性强，可用于筛查。

翼和生物提供嗜肺巴氏杆菌的PCR检测试剂盒，是多重病原同时检测的qPCR试剂盒。多重荧光同时检测鼠棒状杆菌Ck、嗜肺巴斯德杆菌Pp、支气管鲍特杆菌Bb。在必检病原菌联检试剂盒的基础上设计，用于对检出的阳性样本进一步确认所感染病原菌，当然如果研究者怀疑样本感染了上述三种病原，可直接用该鉴定试剂盒进行检测。

本试剂盒采用多套引物探针，在FAM（鼠棒状杆菌 Ck）、HEX（嗜肺巴斯德杆菌Pp）、ROX（支气管鲍特杆菌 Bb）三个通道检测3种病原菌，另外1套引物探针在CY5通道检测内参DNA。该试剂盒具有以下特点：

灵敏：检测灵敏度较高，10 CFU可被有效检出。

稳定：全程闭管操作，无交叉污染。

可靠：含内参对照，避免假阴性。

方便：操作简单，一步法检测。