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严格遵循大小鼠遗传背景鉴定流程是保障鉴定结果准确可靠的关键

发布时间： 2026-01-23　　点击次数： 22次

　　在生物医学研究中，实验大小鼠的遗传纯度是确保数据可重复性与科学有效性的生命线。随着基因编辑、人源化模型及多中心合作研究的普及，遗传背景混淆、亚系误用或种群漂变等问题日益突出。因此，在开展大小鼠遗传背景鉴定时，必须严格遵循规范流程，规避常见误区。以下六大注意事项，是保障鉴定结果准确可靠的关键。
　　一、明确鉴定目的，选择合适大小鼠遗传背景鉴定技术
　　近交系品系确认（如C57BL/6vsBALB/c）：推荐使用SNP分型（≥96个位点），精准度高；
　　亚系区分（如C57BL/6JvsC57BL/6N）：必须包含Nnt、Cd5等已知差异位点；
　　封闭群遗传多样性监测（如SD大鼠）：可结合微卫星（STR）与SNP评估杂合度；
　　避免仅依赖毛色、体重等表型特征——易受环境干扰，无法反映真实基因型。
　　二、规范采样，杜绝交叉污染
　　采样部位：尾尖（2–3mm）、耳缘或口腔拭子，避免血液污染其他样本；
　　工具消毒：每只动物更换剪刀或火焰灭菌，防止DNA残留；
　　样本标识：立即贴编号标签，同步录入电子系统，杜绝人工记录错误。
　　三、关注样本质量与保存
　　新鲜组织优先：冷冻或干燥保存，避免反复冻融；
　　DNA提取质量：浓度＞20ng/μL，OD260/280比值1.8–2.0，确保PCR扩增成功率；
　　禁止使用降解严重或含PCR抑制物（如粪便、垫料污染）的样本。
　　四、选择数据库比对
　　比对参考应来自资源库，如：
　　小鼠：JacksonLaboratory（JAX）、EMMA、MMRRC；
　　大鼠：RGD（RatGenomeDatabase）；
　　警惕实验室自建数据库偏差——若无标准品系对照，结果不可靠。
　　五、警惕“假一致”陷阱
　　仅检测少数位点（如＜20个SNP）可能因巧合匹配而误判；
　　同源品系混淆：如DBA/1与DBA/2在部分位点相似，需全谱系覆盖；
　　建议采用商业化标准试剂盒（如CharlesRiver’sSNPPanel、Transnetyx系统），经验证覆盖关键鉴别位点。
　　六、建立全流程质控体系
　　设置阳性（已知品系）与阴性（无模板）对照；
　　鉴定报告应包含原始数据、位点列表、匹配概率及置信度；
　　定期参与能力验证（如FELASA认证实验室间比对）；
　　禁止仅凭供应商证书替代实际检测——引种后必须复核。

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