生命长短的标记-端粒

端粒由高度重复的 DNA 序列（如人类的（TTAGGG）n）与特定蛋白复合体构成，它为染色体末端提供了稳固的保护屏障，避免其在细胞分裂过程中受到侵蚀与降解。

研究表明，端粒长度与衰老、癌症、神经退行性疾病等多种疾病存在着千丝万缕的联系。从胎儿到老年人，人体细胞的端粒长度随着年龄增长而呈现缩短趋势，它就像一个伴随着生命历程的隐形时钟，记录着细胞的繁衍与衰老轨迹，全血端粒长度甚至可作为其他人体组织端粒长度的替代指标，为评估个体健康状况和疾病风险提供了重要依据。

端粒长度检测的方法有哪些

TRF法检测端粒长度 ：科研和临床金标准

TRF分析也称作端粒的Southern印迹法，是应用针对端粒重复序列的探针来检测限制性酶切后所保留的端粒的方法。

限制性酶会将基因组DNA消化为短的片段， 留下大量完好的端粒，即所谓的端粒限制性片段。

以凝胶电泳分离基因组片段 ，通过放射性探针 (CCCTAA)。

QPCR法检测端粒长度：操作简便，用时短，适用于批量检测

端粒为染色体末端GGGATT 6碱基重复序列 ，设计PCR引物十分困难（二聚体不可避免），也无法设计Taqman探针。

2002年， Richard通过引物中引入突变 ，减少二聚体的产生，成功利用SYBR Green染料法测定端粒的相对长度。

翼和总体设计方案：双重荧光QPCR

Ø 利用SYBR green 染料检测端粒扩增产物

Ø 利用VIC荧光标记的Uniprimer（发夹型）引物，检测内参基因扩增产物

优点：扩增效率高，体系稳定性强，消除孔间差异，减小误差。

端粒扩增产物量远高于内参基因的扩增产物，因此内参基因扩增产物中SYBR green 参入产生的荧光可忽略。