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主营产品:主要技术服务:细胞STR鉴定;支原体检测;细胞种属检测;端粒长度检测;端粒酶活性检测等。

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端粒长度检测试剂盒

端粒长度检测试剂盒

更新时间:2024-03-27

访问量:2032

厂商性质:生产厂家

生产地址:上海

简要描述:
端粒长度检测试剂盒本产品试剂盒采用双色荧光 qPCR(SYRBgreen+VIC)检测端粒相对长度,检测对象为血液、口腔拭子或细胞DNA。
品牌其他品牌供货周期现货
应用领域医疗卫生,生物产业,制药

【产品规格】

1. TL25  25 次/盒

2. TL50  50 次/盒

【产品说明】

端粒长度检测试剂盒(Telomeres):是真核生物线性染色体末端的非编码串联重复性(TTAGGG)n阵列,端粒长度的变化,与衰老、癌症、或神经退行性等多种疾病相关。定量PCR法是检测端粒长度的经典技术,用时短,操作简单,结果准确,适用于批量样本检测。

本产品试剂盒采用双色荧光 qPCR(SYRBgreen+VIC)检测端粒相对长度,检测对象为血液、口腔拭子或细胞DNA。该试剂盒具有以下特点。

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1. 稳定:全程闭管操作,无交叉污染。

2. 可靠:端粒与内参单管检测,减少孔间干扰。

内参基因为多拷贝,与端粒量差降低。

3. 方便:操作简单,无需电泳步骤。

4. 定量: △CT 值,可定量检测端粒相对长度。

【运输及保存条件】

低温冷冻运输, -20℃保存,有效期 1 年,冻融以后,4℃保存,有效期4周。

【产品组分】

注:本试剂盒提供试剂,使用前请上下轻柔颠倒十次混匀,后低速离心、小心开启。避免起泡。

【操作步骤】

1. 样品质控

使用商业化DNA抽提试剂盒提取血液、细胞或组织DNA,DNA纯度A260/A280≈1.8,检测样品浓度标化为15~20ng/µL,上样4µL。

注:标准品浓度已标化为15~20ng/µL,上样4µL。样品及标准品浓度过高或过低会影响扩增效率,对实验造成干扰,测量结果误差较大。

2. qPCR反应体系及条件

反应体系以20µL为例











PCR仪设置以 ABI 7500为例,其他型号定量PCR仪应通过标准品进行参数校正或咨询专业技术人员。


【基线设置】

内参基线设定:以标准品基线设定内参基线,将内参的基线设定为6~15个循环。

端粒基线设定:以标准品基线设定端粒基线,将端粒的基线设定为3~15个循环。

【阈值设置】

内参阈值设定:以标准品CT值设定内参扩增曲线阈值,将内参的 CT 值定为 21±1。

端粒阈值设定:以标准品CT值设定端粒扩增曲线阈值,将端粒的 CT 值定为13±1 。

端粒长度检测试剂盒说明:

(1)如果标准品的内参CT 值>25,但阴性对照管的内参CT 值正常, 表明试剂盒扩增效率下降或仪器运行障碍。

(2)如果阴性对照管的内参或端粒CT<25,表明在环境或加样过程中存在轻微污染。

备注:

1. 样本检测以及标准品的使用应做技术上三重复,阴性对照做单重复。

2. 如果检测样本为血液DNA,可以将所得端粒相对长度在上海翼和应用生物技术有限公司构建的1500例中国人群数据库比对,评估样本个体端粒的相对长度;若选用其他样本,建议自行构建数据库并做进一步分析。

3. 端粒长度计算方法(T/S):先分别计算标准品与样品的△CT=CT(端粒)-CT(内参)

再计算 T/S=log2 (△CT(样品)-△CT(标准品))

注:T为待测样品,S为标准品,T/S为待测样品与标准品的端粒相对长度比。




 

 

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